Human Dil-HDL的操作步骤

参数信息

浓度：0.8-3.0 mg/mL

外观：乳状液体

Ex/Em：549 nm/565 nm

吸光度比例：1.4

缓冲液组分：0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4

规格：500ug

纯度：≥95%

生产厂商：西安强化生物科技

运输条件：冰袋运输，避免反复冻融。

保存方法：4℃无菌避光保存，收到后可稳定使用6周，不可冻存。

简单概述

Human Dil-HDL为荧光探针DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl- indocarbocyanine perchlorate）标记的高密度脂蛋白，可以用来观察培养细胞的HDL结合位点，或筛选HDL受体表达缺陷型细胞突变株。

也可以通过流式细胞术评估细胞受体水平，或检测组织内的受体水平。

制备方法

纯化的人健康血浆来源的HDL直接标记上DiI荧光探针，然后通过超速离心以及透析的方法纯化回收标记产物，并滤膜过滤除菌。

纯化的Human Dil-HDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS，pH 7.4中。

操作步骤

稀释：无菌条件下，用细胞培养基或PBS将DiI-HDL稀释至10–30 μg/mL。

孵育：加入活细胞中，37℃培养4–5小时，使HDL与细胞表面受体结合。

洗涤：吸去培养基，用无探针培养基洗去未结合的DiI-HDL。

荧光显微镜检测：使用红色荧光滤光片（Ex/Em=549 nm/565 nm），避免甲醇/丙酮固定（DiI溶于有机溶剂）。

相关试剂

人源低密度脂蛋白

人极低密度脂蛋白

人源高密度脂蛋白

Ethidium Homodimer 1 (EthD-1)

Ethidium Homodimer 3 (EthD-3)

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EthidiumMonoazideBromide(EMA)叠氮溴化乙锭

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