人总Tau蛋白检测试剂盒

人总Tau蛋白检测试剂盒（ELISA）Human Total Tau Assay Kit - IBL，日本IBL品牌，科润达生物代理

产品规格

96T

产品预期用途

本产品仅供科研用，不用于临床诊断。

检测原理

该人总Tau蛋白检测试剂盒是固相夹心ELISA（酶联免疫吸附测定）。当将第一抗体包被在平板上时，将样品和标准品加入到板孔中进行第一次反应。 反应后，加入HRP-缀合的二抗进入板孔进行第二次反应。 冲洗掉未结合的二抗后，将四甲基联苯胺（TMB）加入孔中并显色。

检测样本

人脑脊液

储存条件

2-8℃保存，有效期见试剂盒外包装

试剂盒成分

1  预包被板

2  酶标记抗体:

3  标准品:

4  EIA缓冲液:  

5  标记抗体稀释液:                    

6  显色剂:  

7  终止液:  

8  浓缩洗涤液:        

实验所需器材(但试剂盒没有提供)

 酶标仪                        微移液管及其枪头

 量筒及烧杯               去离子水

 冰箱(4°C)                   坐标纸(log/log)

 吸水纸                        试管(用于标准品稀释)

 洗瓶 (用于洗板)  孵育器（37±1℃）

 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)

实验操作步骤

准备

1) 洗涤液的准备

试剂盒的洗涤液是一种40倍浓缩液,应稀释为1X洗涤液进行洗板用。使用前平衡至室温并混匀，根据需要量进行配置。

2）酶标记抗体的准备

试剂盒中的标记抗体是一种30倍浓缩物,根据所需量用标记抗体稀释液稀释.稀释后的标记抗体才能用于检测步骤。

示例:

如果你用一条板(8孔),就需800μL.的标记抗体。用870 μL的标记抗体稀释液稀释30  μL浓缩液,充分混匀.并每孔各加100 μL此步操作需要酶标记物加入之前才能进行

剩余的浓缩标记抗体液需密封瓶装,存于4°C

2) 标准品的准备

加0.5 mL的去离子水到瓶装标准品中充分溶解,制成2,200 pg/mL. 的标准品液，该溶解后的标准品可以冷冻保存，但应避免反复冻融。

标准品的稀释

准备7支试管,并每支各加230 μL  EIA缓冲液.

将2,200 pg/mL. 的标准品230ul加入到试管-1中混匀，制成1100 pg/mL. 的标准品，再取1100 pg/mL. 的标准品230ul到试管-2中混匀，550 pg/mL. 的标准品，以此类推，做2倍倍比稀释，制成1100—17.2 pg/mL. 的标准品系列。