食物不耐受90种抗体IBL试剂盒,酶联免疫法定量检测
【产品名称】
通用名称:88项食物筛查IgG检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:IgG Food Screen 88 ELISA
【产品规格】
15x1x96T
【预期用途】
该试剂盒用于定量测量人血清和血浆(EDTA,柠檬酸盐,肝素)中的88种食物过敏原的特异性IgG抗体。
【检测原理】
在微孔板的每个孔包被有来自食品或食品混合物的抗原。为了测试,将血清或血浆样品稀释并转移至微量滴定孔。样品中特异性IgG(sIgG)抗体将与食品提取物的相应抗原结合。再加入特异性辣根过氧化物酶(HRP)结合的抗人IgG抗体去结合并检测人IgG。在加入底物TMB(3,3'5,5'-四甲基联苯胺)后,通过溶液的蓝色显色结合IgG抗体。加入终止溶液中断反应,蓝色变成黄色。其强度与结合抗体的量相关。通过吸光度测量来量化黄色。食物不耐受在儿童慢性腹泻、肠易激综合症、小儿腹痛等疾病中的作用越来越受到重视,有研究证实:年龄越小,食物不耐受现象发生率越高。这是因为低龄儿童消化系统功能尚未健全,无法充分的消化食物,通过食物不耐受系列试剂盒的检测,从而及早发现诱因,选择安全的食物,已成为儿童健康管理的重要手段。
【贮存】
试剂盒储存在 2-8℃ 阴凉处。所有试剂(洗涤缓冲液除外,参见试验前说明部分)都是即用试剂,装在试剂瓶中。
有效期印在试剂盒标签上。试剂盒效期针对里面所有组分整体而言,不管单个组份的效期是否有别。到效期后,必须弃用所有组分。在用试剂保质期:2-8℃ 至少 40 天,但不超过失效日期。
【试剂盒组成】
食物不耐受90种抗体IBL试剂盒含有15个微量滴定板和足够的试剂,用于测试15个患者样品。每个板可以测试1名患者,每个患者样品测试88种过敏原。
【检测步骤】
1 | 使用前,所有试剂和检测设备必须恢复至室温(18-30℃)至少30分钟。 |
2 | 一个样品一块板。标准品和质控放在第1板条A-H位置。见第18节板布局图。 |
3 | 分别取100ul稀释好的样品和未稀释的标准品及质控加入到微孔板相应孔中。 |
4 | 孵育:37℃孵育60分钟。 |
5 | 去掉孔中样品、标准品和质控,并在吸水纸巾上轻轻拍打微孔板(倒扣)。 |
6 | 手动或自动洗板机每孔添加300uL洗涤液,然后去掉洗涤液。重复此洗板步骤3次。最后一次将板轻轻在吸水纸上拍打去掉孔内及边沿部分残余洗液。 |
7 | 移取100uL酶联物 |
8 | 孵育:37℃孵育60分钟。 |
9 | 手动或自动洗板机每孔添加300uL洗涤液,然后去掉洗涤液。重复此洗板步骤3次。最后一次将板轻轻在吸水纸上拍打去掉孔内及边沿部分残余洗液。 |
10 | 移取100ul TMB底物液至各孔中。 |
11 | 孵育:37℃孵育15分钟。 |
12 | 移取100ul TMB终止液至添加底物的各孔中。 此步操作之前不要洗板!终止液可使蓝色溶液变成黄色。 |
13 | 上酶标仪前检查孔内是占有气泡,微孔板底部是否有刮痕、脏污等。测定450nm波长下吸光度。校正测量推荐在600-700nm下测量。 |
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