巴贝斯原虫IgG检测试剂盒(间接免疫荧光法IFA)
【产品名称】
通用名称:巴贝斯原虫IgG试剂盒(间接免疫荧光法)
英文名称:Babesia microti IFA IgG Antibody Kit
【产品规格】
120T
【预期用途】
可用于检测人血清、血浆中抗巴贝斯原虫IgG抗体。
【前言简介】
北美的巴贝斯虫病是由巴贝斯原虫所引起的。它主要是通过受感染的壁虱叮咬进行传播并且人们一般认为,它可以与人粒细胞埃立克体(HGE)以及/或伯氏疏螺旋体协同传播。在以往,巴贝斯虫病的诊断是通过将外周血进行涂片处理,观察红细胞内含物的形态特征。试剂盒采用了被巴贝斯虫感染的仓鼠或者小鼠红细胞作为检测特异性抗体的抗原。
【检测原理】
巴贝斯原虫IgG检测试剂盒实验实施时,病人血清使用缓冲液稀释后加入到单独的孔中进行温育,使血清中的抗体与孔中抗原相结合。洗涤一次以洗去未反应的血清蛋白,然后加入荧光标记的抗人IgG抗体。再次洗涤洗去未结合的标记物。之后通过荧光显微镜进行观察。阳性结果可以观察到红细胞内边界清晰的苹果绿荧光显色的包含物。阳性结果随后继续检测以得出最高的滴度。
【试剂盒组成成分】
检测玻片 10片
每片12个孔,含特异性抗原。
荧光标记物 2.5ml
黄盖滴瓶,含荧光标记的抗人IgG,BSA。
阳性质控 0.5ml
蓝盖滴瓶,含阳性人血清,滴度1:64,终点滴度1:512。
阴性质控 0.5ml
红盖滴瓶,含阴性人血清,滴度1:50。
封固剂 1ml
白盖滴瓶,含50%甘油的PBS。
洗涤液 1L
将所提供的洗涤液加入到1L纯化水中,得最终PH7.2。
所需材料(未提供)
1. 蒸馏水
2. 250或者500ml洗瓶
3. 稀释用试管
4. 移液器
5. 24×50mm盖玻片
6. 荧光显微镜
7. 37℃温育器
8. 湿盒
【储存条件及有效期】
2-8℃下保存,效期内有效。
【样本要求】
允许全血样品凝集,通过离心分离出血清样本。2-8℃下可保存5天,要保存更长时间需储存在-20℃环境下。
【检测方法】
1. 疑似的人样本用PBS按1:64进行预稀释。
2. 按需要稀释阳性质控。(注:所提供的阳性质控已经1:64稀释过)。
3. 对应孔中加入10ul稀释好的病人样品,阴性质控以及稀释好的阳性质控。
4. 将玻片放入湿盒中,37℃下温育30分钟。
5. 将玻片取出,使用洗涤剂洗涤3次,不要让孔中变干。
6. 每孔加入1滴(10ul)的荧光标记物,放回到湿盒中,37℃下避光温育30分钟。
7. 重复步骤5。
8. 玻片上滴加2-3滴封固剂,盖上盖玻片。
9. 使用荧光显微镜在400× 视野下,观察玻片。玻片可在2-8℃下避光保存24小时。
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