斑点热立克次体IgG检测试剂盒(酶联免疫法)
【产品名称】
通用名称:斑点热立克次体IgG抗体试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Spotted fever Rickettsia IgG Antibody Kit
【产品规格】
96T
【预期用途】
该试剂盒用于人血清、血浆中抗斑点热立克次体IgG的体外定性检测。
【前言简介】
斑点热立克次体出现在全球范围内,并且通过受到感染的扁虱、螨虫和跳蚤进行传播。人体受感染后会诱导产生出特异性的抗体回应,产生的特异性抗体是可以被检测到的,因此可以被当做一种间接的检测手法来诊断受感染的人群。
【检测原理】
试剂盒微孔板中包被有从斑点热立克次体中提取出的脂多糖(rLPS)。病人血清用样品稀释液稀释,之后样品被加入到微孔中孵育。孵育过程中,血清抗体与微孔板抗原发生特异性结合。洗板洗去未结合的部分,之后加入酶标的抗人IgG。孵育过后洗板,洗去未结合上的酶联物。之后加入酶底物液反应。形成蓝色,颜色的深度与样品中特异性IgG的浓度成正比。定时反应后,加入终止液,颜色变黄,微孔板使用酶标仪在450nm下读取吸光值。
【试剂盒成分】
微孔板 12×8
包被有斑点热立克次体外脂多糖抗原(rLPS)
样品稀释液 2×50ml
含牛血清蛋白及吐温20、硫化汞的PBS缓冲液 即用型
酶联物 1×12ml
辣根过氧化物酶标记的抗人IgG 即用型 避光保存
阳性质控 1×120μl 1:10预稀释
临界质控 1×200μl 1:10预稀释
阴性质控 1×120μl 1:10预稀释
底物液 1×12ml
琥珀色瓶,含TMB底物液以及双氧水 即用型 避光保存
终止液 1×12ml
含稀释好的硫酸 即用型 避免接触皮肤
PBS缓冲液
将试剂盒提供的小包加入到1L蒸馏水中 以配置PBS缓冲液
吐温20 1×2ml
加入到1L的PBS缓冲液中 配制成洗液。
所需材料(未提供)
1. 蒸馏水
2. 洗瓶
3. 试管
4. 移液器
5. 粘性盖板
6. 450nm读数酶标仪
【储存及稳定】
试剂盒应2-8℃保存,在实验前应先平衡至室温(20-25℃)。剩余的微孔板需密封保存在包装袋中。
【样品采集及处理】
允许全血样品凝集,通过离心分离血清样品。2-8℃下保存。要保存5天以上,请于-20℃环境下保存。
【检测方法】
洗涤液
将2ml吐温加入到1L配制好的PBS缓冲液中,混匀。
样品
使用样品稀释液按1:100比例稀释样品。
质控品
使用样品稀释液按1:10比例稀释已经预稀释的质控品。最终得1:100稀释的质控品。
检测过程
1. 移取阳性质控、阴性质控、临界质控、样品各100μl到相应的微孔中,临界质控做双孔检测。
2. 盖板,在室温下孵育60分钟。
3. 使用洗涤液洗板至少3次,并在吸水纸上拍干。
4. 每孔加入100μl酶联物。
5. 盖板,在室温下避光孵育30分钟。
6. 洗板同步骤3。
7. 每孔加入100μl TMB底物液,暗光下准确孵育10分钟。
8. 每孔加入100μl终止液。
9. 使用酶标仪在450nm波长下读取吸光值。
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