人载脂蛋白A5检测试剂盒(ELISA)Human ApoA5 Assay Kit - IBL
产品规格
96T
产品预期用途
本产品仅供科研用,不用于临床诊断。
检测原理
该载脂蛋白A5检测试剂盒是固相夹心ELISA(酶联免疫吸附测定)。当将第一抗体包被在平板上时,将样品和标准品加入到板孔中进行第一次反应。 反应后,加入HRP-缀合的二抗进入板孔进行第二次反应。 冲洗掉未结合的二抗后,将四甲基联苯胺(TMB)加入孔中并显色。
检测样本
人血清和EDTA-血浆
储存条件
2-8℃保存,有效期见试剂盒外包装
试剂盒成分
1 预包被板: 抗人ApoA5(53A2)鼠单克隆抗体 96T x 1
2 酶标记抗体:
(30倍浓缩)HRP标记抗人ApoA5(63A2) 小鼠IgG Fab’) 0.4mL x 1
3 标准品: 重组人ApoA5 0.5mL x 2
4 EIA缓冲液: 30mL x 1
5 标记抗体稀释液: 12mL x 1
6 显色剂: 15mL x 1
7 终止液: 12mL x 1
8 浓缩洗涤液: 50mL x 1
实验所需器材(但试剂盒没有提供)
酶标仪 微移液管及其枪头
量筒及烧杯 去离子水
冰箱(4°C) 坐标纸(log/log)
吸水纸 试管(用于标准品稀释)
洗瓶 (用于洗板) 孵育器(37±1℃)
一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)
操作注意事项:
1) 收集后应尽快测定样品。对于样品的储存,冻存并避免反复冻融。在低温下解冻测试样品,并在测量前将其混合。
2) 样本应用本试剂盒中所含的“4,EIA缓冲液”稀释。
3) 建议对测试样品和标准品进行重复测量。
4) 每个测定应运行标准曲线。
5) 在中性pH范围内使用测试样品。有机溶剂的污染可能影响测量。
6) 使用前,将所有试剂置于室温(R.T.)并在使用前轻轻混合。混合后,确保试剂质量无变化。
7) 仅使用本试剂盒中包含的“8,浓缩洗涤缓冲液”,进行洗板。洗涤不足可能导致测量失败。
8) 推荐使用洗板机(等待时间为零秒)。每次反应后立即用洗板机清洗酶标板。如果你使用洗涤瓶子代替洗板机,在每个板孔中填充洗涤缓冲液后,立即将板倒置并摇动,以清除洗涤缓冲液。按照测量程序第3节中描述的测量次数进行洗涤。应洗涤的要求进行,以避免任何不充分的洗涤。
9) 每个洗板程序的最后一次洗板后,将酶标板在吸水纸上拍干,以清除任何残留的洗涤液。
10) “6,Chromogen-TMB溶液”应由于其对光敏感性而在黑暗中储存。也应避免与金属接触。每次使用应根据所需要的量取出到收集容器内备用。
11) 将TMB溶液加入孔中后,液体逐渐变为蓝色。在这个过程中,反应板应置于黑暗中。收集容器中剩余的TMB的溶液不能返回原来的瓶子,以避免污染。
12) 应在加入“7,终止液” 30分钟内完成O.D. 测量。
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