跨膜电阻实时无标记细胞动态分析仪
应用领域:
☆ 细胞屏障(血脑屏障、鼻黏膜及消化道屏障等)的特性
☆ 上皮细胞、内皮细胞、贴壁细胞等的跨膜电阻测量
☆ 紧密连接动力学
☆ 新型药物研发
☆ 药物或毒物对细胞屏障功能的影响
☆ 肿瘤侵袭转移
☆ 免疫细胞在中枢神经系统疾病中的作用
设备特点:
☆ 不干扰细胞正常生长环境--测量的数值更加真实
☆ 超长时间全自动实时分析--测量的数据更加完整
☆ 测量采用更宽的频率范围--拟合的数据更加精确
☆ 构建的数理模型更加细致--电生理参数更加丰富
☆ 可兼容多种类型培养插件--耗材选择更加多样化
基本参数:
☆ 可以直接读取细胞屏障层的电阻值TEER (Ω.cm2);
☆ *兼容常用厂家的Transwell细胞培养皿。包括BD,Biosciences,Corning,Bio-One,Millipore等。无仪器自带耗材和其他额外耗材;
☆ 细胞模块可以同时容纳6/24/48/72/96个培养皿。每个培养皿都有三种型号可选:小孔型(“24孔"型Transwell培养皿),中孔型(“12孔"型Transwell培养皿),大孔型(“6孔"型Transwell培养皿);
☆ cellZscope细胞模块是放置于标准的细胞培养箱中,实时动态监测,可以监测数秒到数周的细胞动态生物学行为变化。
技术原理:
表皮或内皮细胞之间通过紧密连接形成一层具选择性的细胞屏障,细胞屏障不仅控制邻近细胞间间隙对各种溶解物的扩散渗透率,而且调控跨细胞物质转运。细胞屏障的存在一方面保护了机体免受有害物质的伤害,另一方面也限制了治疗性药物的进入。
细胞屏障的通透性可以通过跨膜电阻(即TEER,Transepithelial resistance)来反映,细胞屏障的通透性与跨膜电阻TEER之间的关系为:通透性越高TEER越低,反之亦然
4种不同型号可供选择:cellZscopeE、cellZscope+、cellZscope2、cellZscope3
cellZscopeE
☆ 入门级的cellZscopeE型号更灵活,如果您没有较高的通量检测,可以选择cellZscopeE
☆ 多达6个通道的TER检测
☆ 细胞培养环境下实时长时间检测
☆ 可以兼容多种transwell小室
☆ 操作简单,清洗方便
cellZscope2
☆ cellZscope2型号为基于阻抗的细胞监测提供了一些全新的体验
☆ 在时间分辨率达到了新的高性能基准。多通道数据采集使cellZscope2提供了快速、*的阻抗输出
☆ 特殊的易用性,更换培养基等细胞培养常规操作,无需插拔数据线,数据稳定性更高
☆ cellZscope2更快的性能允许更高的吞吐量。在实验前,实验中和实验后,方便细胞模块与控制模块的数据对接
cellZscope2
☆ cellZscope2型号为基于阻抗的细胞监测提供了一些全新的体验
☆ 在时间分辨率达到了新的高性能基准。多通道数据采集使cellZscope2提供了快速、*的阻抗输出
☆ 特殊的易用性,更换培养基等细胞培养常规操作,无需插拔数据线,数据稳定性更高
☆ cellZscope2更快的性能允许更高的吞吐量。在实验前,实验中和实验后,方便细胞模块与控制模块的数据对接
cellZscope3
☆ 四个细胞模块,每个有24个孔,可以连接到一个cellZscope3控制器,同时测量96个孔
☆ 自动化的,快速的全程监控,获得数天或数周的长期监测数据
☆ 特殊的易用性,更换培养基等细胞培养常规操作,无需插拔数据线,数据稳定性更高
☆ 时间分辨率高:cellZscope3每30秒完成单个细胞模块即24孔的检测
应用案例:
跨膜电阻实时无标记细胞动态分析仪可以检测Caco-2细胞屏障的完整性
用跨膜电阻(TEER)值法检测Caco-2细胞屏障的完整性。Caco-2细胞以5×103细胞/孔的密度接种于Transwell小室中。一周每隔一天更换一次新鲜培养基,然后在接下来的两周每天更换一次新鲜培养基。并使用NanoAnalytics公司 Cellzscope2软件对所得实时数据进行分析。
Caco-2细胞培养19天后,细胞跨膜电阻值≥500 Ω·cm2,细胞形成一个完整的单层屏障,完整性通过Lucifer Yellow渗透性测试得到进一步得到证实,进而单层细胞屏障可用于下一步的运输实验。SRL和SRL NCs的细胞毒性呈浓度依赖性(图1B)。SRL和SRL-NCs的半数大抑菌浓度分别为147.51μg/mL和165.41μg/mL。在50μg/mL的SRL和SRL-NCs作用72h后,细胞存活率保持在80%以上。这表明本研究中使用的SRL浓度不会引起显著的细胞毒性。因此,药物对细胞活力的影响可以忽略不计。
转运实验采用完整紧密连接的肠上皮Caco-2细胞单层作为模型,SRL和SRL-NCs组的跨膜电阻(TEER)值(图1D)在整个转运过程中未显示出任何显著变化,表明在没有紧密连接遭到破坏的情况下,Caco-2细胞单层的完整性得以维持。
将含药物HBSS缓冲液和空白HBSS缓冲液分别添加到模型顶层(AP)和基底外侧(BL)侧,模拟药物从GIT到血液的吸收和转运途径。也就是说,细胞层从GIT中运出药物并将其输送到血液/肠系膜淋巴。相反,当将药物HBSS缓冲液添加到BL侧和空白HBSS缓冲液添加到AP侧时,模拟了动物血液进入肠腔的过程。计算出SRL-NCs的流出速率由于Papp、BL-AP/Papp、AP-BL与SRL显著不同(图1C)。原因可能是药物被纳米化后药物变得更小,比表面积增加,因此跨单层的转运显著增强。另一种可能是细胞占据了整个SRL-NCs结构,因此与SRL组相比,通透性增强,SRL-NCs组AP→BL侧Papp高5.6倍,外排率低。
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