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疾控适用-利什曼原虫抗体ELISA试剂盒

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  • 广东广州市

更新时间:2024-04-22

有效日期:还剩353

利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)ELISA试剂盒
仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)的含量。
有效期:6个月
保存条件:2-8℃


[实验原理]

试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。


[样本处理及要求]

1.  血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2.  血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织*碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。


[需要而未提供的试剂和器材]

1.酶标仪(450nm)

2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

4.蒸馏水或去离子水

[试剂盒组成]

             

利什曼原虫,一种微小的鞭毛虫,在动质体目锥体虫科动物中占据着特殊的地位。这种原虫主要寄生于哺乳动物、爬行类等动物体内,给宿主带来一系列健康问题。在医学领域,利什曼原虫引发的疾病统称为利什曼病,其分布广泛,影响深远。

利什曼原虫的种类繁多,其中寄生于人体的主要有三种,其中杜氏利什曼原虫的危害尤为严重。这种原虫主要寄生于人体的肝、脾、淋巴腺等细胞之内,通过其微小的鞭毛在细胞内移动并繁殖。当人体被感染后,会引发黑热病,这是一种严重的疾病,患者会出现发热、肝脾肿大、贫血等症状。如果不及时治疗,死亡率高达90%以上,是
我国五大寄生虫病之一。

利什曼病的传播主要依赖于特定的媒介,如白蛉子。这些吸血的小昆虫在吸食了带有利什曼原虫的动物血液后,原虫会在其体内繁殖形成细滴虫。当白蛉子再次吸食人血时,细滴虫就会被接种到人体内,使人感染。此外,病犬也是利什曼病的重要传播源,因此,在疫区,消灭病狗也是预防利什曼病的重要手段之一。

利什曼病在全球范围内的分布广泛,主要流行于非洲、亚洲、欧洲南部和南美洲等地。在我国,皮肤利什曼病最早发现于20世纪80年代,新疆和中国台湾*病例报道,患者以青壮年为多。随着全球化的推进和气候变化的影响,利什曼病的传播范围也在不断扩大,对全球公共卫生构成了严重威胁。

利什曼原虫抗体ELISA试剂盒

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