DNA提取流程图:
本制品是新一代的高保真DNA聚合酶。该酶基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase,经基因工程改造而成。其蛋白结构包含5'→3'聚合酶结构域和经过改造的3'→5'外切酶结构域。这种组合大幅度提升了酶的耐热性,保真性。耐热温度达到98℃,保真性是Taq DNA聚合酶的52倍,普通Pfu DNA聚合酶的6倍。酶溶液中添加了*的延伸因子,扩增速度达到15 sec/kb。本产品配备了优化后的酶缓冲液,添加了PCR增组分,使得该酶具有的扩增效率和广泛的模板适应性,非常适合复杂模板的扩增。扩增产物为平末端。
产品组成:
组分 10U
High-Fidelity DNA Polymerase(2U/μL) 5μL
2×PCR buffer(含Mg2+,dNTPs) 300μL
储存条件:-20℃保存,有效期2年。
产品属性:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
高保真DNA聚合酶 | High-Fidelity DNA Polymerase | 10U|100U|500U|1000U | FS-01F10542 |
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。产品仅用科研
采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
植物磷脂酶D1(Phospholipase D1)活性比色法定量检测试剂盒
细菌磷脂酶D1(Phospholipase D1)活性比色法定量检测试剂盒
细胞磷脂酶D1(Phospholipase D1)活性荧光定量检测试剂盒
组织磷脂酶D1(Phospholipase D1)活性荧光定量检测试剂盒
纯化微粒体磷脂酶D1(Phospholipase D1)活性荧光定量检测试剂盒
HumanAmylinELISAKit 人胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 1-Benzyl D-aspartate 79337-40-9 中文名:D-天冬1-苄酯 分子式:C11H13NO4 度:98.0%
Humanalveolibasememembranezoneaibody,ABM-AbELISAKit 人抗肺泡基底膜抗体(ABM-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 (2-Benzothiazolylthio)acetic acid 6295-57-4 中文名:2-(苯并噻唑基硫代)乙酸 分子式:C9H7NO2S2 度:98.0% 关键词:
HumanAi-ypsin,ATELISAKit 人抗(AT)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 1-Ethyl-3-nitrophthalate 中文名: 分子式:C10H9NO6 度:98.0%
Humanai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit 人抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 ((2-cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinolin-3-yl)methyl)triphenylphosphonium bromide 154057-58-6 中文名: 分子式:C37H30BrFNP 度:98.0% 关键词:
Humanai-sp100-aibodyELISAKit 人抗sp100抗体(sp100)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 (R)-4-Methoxydalbergione 中文名:(R)-4-甲氧基黄檀醌 分子式:C16H14O3 度:98.0%
高保真DNA聚合酶氯美扎酮(标准品) Chlormezanone 质量规格:UV法溶出度检查 Porcinelowmolecularweightheparin,LMWHELISA试剂盒猪低分子肝素(LMWH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氢钙(标准品) Calcium hydrogenphosphate dihydrate 质量规格:UV法含量测定 小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒 ,英文名: HMGB-1 ELISA Kit
磺胺二甲 (标准品) Sulfamethazine 质量规格:含量测定 大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA检测试剂盒Ratalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 96T/48T
磺胺脒(标准品) Sulfaguanidine 质量规格:HPLC法含量测定 人白介素8(IL-8/CXCL8)试剂盒 Human Ierleukin 8 ELISA KIT
芬布芬(标准品) Fenbufen 质量规格:含量测定 SheepPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
曲克芦丁(标准品) Troxerutin 质量规格:HPLC法含量测定 P38蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
二羟丙茶碱(标准品) Diprophylline 质量规格:含量测定 Porcinemacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA试剂盒猪巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
盐酸地巴唑(标准品) Bendazol 质量规格:HPLC法含量测定 小鼠高迁移率族蛋白1(HMGB1)ELISA试剂盒 ,英文名: HMGB1 ELISA Kit
氯喹(标准品) Chloroquine diphosphate 质量规格:HPLC法含量测定 大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA检测试剂盒RatSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit 96T/48T
(标准品) Promethazine 质量规格:含量测定 人白介素7(IL-7)试剂盒 Human IL-7 ELISA kit
操作说明:
使用研钵进行匀浆时:
① 取1~100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的研钵中,快速用力展研成匀浆。
注)下列组织请加液氮研磨至粉末状。
A.富含DNA酶的胰脏、脾脏、胸腺、淋巴等组织。
B.富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等组织。
C.富含角质蛋白的组织或坚硬的组织(如骨骼)等。
② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1,温和研磨30秒钟。
注)使用上述①-注)的实验材料时,请在加入Solution A及RNase A1后,将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。
③ 收集650 μl研磨好的组织匀浆液移至Collection Tube中。如果匀浆体积不足650 μl,请补充Solution A至650 μl,65℃保温5分钟。
使用研磨棒进行匀浆时:
① 取1~100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的Collection Tube 中,用研磨棒快速研磨成糊状。
② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成匀浆。
③ 加入350 μl的Solution A将研磨棒上的匀浆冲入Collection Tube中,充分振荡混合后,65℃保温5分钟。
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