SK-BR-3 [SKBR3] (乳腺腺癌细胞)说明

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

下列产品详细介绍：
产品名称：SK-BR-3 [SKBR3] (乳腺腺癌细胞)说明
货号：FS-01X6530
单位：1×10⁶cells/T25培养瓶
分类：细胞系
生长培养基 McCoy’s 5A＋10% FBS＋1% P/S
商品介绍：
产品　SK-BR-3 [SKBR3] (乳腺腺癌细胞) (STR鉴定正确)
别称 SK-Br-3; Sk-Br-3; SK BR 03; SKBR-3; SKBr-3; SK-BR3; SKBr3; SkBr3; SKBR3

种属 人类

年龄（性别） 女性，43岁

组织来源 乳腺；乳房；肋膜渗出液转移灶

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述 SK-BR-3 [SKBR3]细胞是由Trempe·G和Old·L·J于1970年从一位43岁的白人女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离得到的。SK-BR-3 [SKBR3]细胞亚显微结构特征包括微丝和桥粒、肝糖原颗粒、大溶酶体、成束的细胞质纤丝；SK-BR-3 [SKBR3]细胞过表达HER2/c-erb-2基因产物。

生物安全等级 1

生长培养基 McCoy’s 5A＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 1:2-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

倍增时间 ~48-72小时

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice; forms poorly differentiated adenocarcinoma.

受体表达情况 Blood Type A; Rh+; HLA A11, Bw22 (+/-), B40, B18

注意事项 1. SK-BR-3细胞从冷冻保存中恢复的速度可能很慢。SK-BR-3细胞在低温保存恢复过程中的附着会很轻。这很正常。这种细胞系在培养的整个第一周以及每次继代培养后都表现出松散的附着和漂浮的细胞，这并不少见； 2. 如果存在大量漂浮物，尤其是在生长的第一周，在启动复苏后几天内保持细胞不受干扰。如果仍然有很多漂浮物，用台盼蓝检查生存能力。通过轻轻离心保留漂浮细胞，并在更换培养基时将其与附着的细胞一起添加回同一培养容器中，这一点很重要。不要分离或丢弃漂浮细胞。细胞初以小斑块或细胞群的形式附着，许多细胞团仍处于悬浮状态。几天后，生长将从贴壁细胞群向外延伸。通常也会出现一些细胞碎片。漂浮细胞应始终通过温和离心（125 x g，持续5至7分钟）保留，并在换液或传代后放回培养容器； 3. SK-BR-3细胞倾向于相互堆积。在细胞达到70-80%汇合度之前不要用消化处理细胞。如果让细胞过度生长，细胞就会分离漂浮。

保藏机构 ATCC; HTB-30 DSMZ; ACC-736
实验材料：
1. 50ml配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml灭菌烧杯2个； 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；

细胞复苏步骤：
1：水浴锅预热至37℃备用
2：准备15mL离心管，并向其中加入适量培养基待用
3：将细胞冻存管从-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴锅
4：用力摇晃冻存管，使其在1分钟内融化
5：用纸巾擦拭水渍，转移至生物安全柜。用移液枪吸取细胞悬液，缓慢滴加到步骤2中准备好的离心管
6：1200rpm离心3分钟
7：弃上清，用新鲜培养基重悬细胞，接种至新的无菌培养器皿中

公司细胞胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。

cDNA 第二链合成试剂盒30 次  动物种属鉴定 PCR Mix 6100 次

一管式双链 cDNA 合成试剂盒10 次  动物种属鉴定 PCR Mix 5100 次

Oligo dT12-18 引物，0.5μg/μL5μg  动物种属鉴定 PCR Mix 4100 次

6nt 随机引物，0.5μg/μL5μg  动物种属鉴定 PCR Mix 3100 次

10nt 随机引物，0.5μg/μL5μg  动物种属鉴定 PCR Mix 2100 次
AGL1 农杆菌感受态细胞10×100μL  Wortmannin(PI3K 抑制剂 )0.5mg

EHA105 农杆菌感受态细胞10×100μL  WGA 糖蛋白分离试剂盒10 次

GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL  Vinblastine( 长春新碱 )100μL

LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL  UTP 溶液，2.5mM2mL

AH109 酵母感受态细胞10×100μL  UTP 溶液，100mM0.25mL

Tricine-SDS-PAGE 阳极电泳液 ( 干粉 )10L  JM110 感受态细胞10×100μL

Tricine-SDS-PAGE 阳极电泳液 ( 干粉 )50L  JM109 化学感受态细胞0.1mL×10

Tricine-SDS-PAGE 阴极电泳液 ( 干粉 )10L  JC-11mg

Tricine-SDS-PAGE 阴极电泳液 ( 干粉 )50L  JC-105mg

一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 高 pH)30 次  IPTG 溶液，200mg/mL1.5mL
SK-BR-3 [SKBR3] (乳腺腺癌细胞)说明大鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)elisa检测试剂盒免费代测

大鼠β防御素2(DEFB2)elisa检测试剂盒

大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa检测试剂盒

大鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)elisa检测试剂盒

大鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)elisa检测试剂盒免费代测