供应TC总胆固醇测试剂盒可见分光光度法

商品介绍

测定意义
血清TC是指血液中所有脂蛋白所含之总和。总包括游离和酯。肝脏是TC合成和贮存的主要器官。是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维等生理活性物质的重要原料，也是构成细胞膜的主要成分，其血清浓度可作为脂代谢的指标。临床上将血总增高称为高血症。

测定原理

酯酶催化酯作用下水解成游离（FC）和游离脂肪酸（FFA），FC在氧化酶作用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2，H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下，经过氧化物酶作用下生成红色醌类化合物，其颜色深浅与TC含量成正比

自备用品

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水

自备仪器和用品：
酶标仪、离心机、移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水
测定步骤：
1、酶标仪预热30min以上，调节波长至450nm。
2、试剂三的稀释：将试剂三用蒸馏水稀释50倍，用多少配多少。（试剂三和蒸馏水1：49稀释。
3、工作液配制：在试剂一加入100μl试剂二，充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。（若一次性测定样本较少，可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml：0.1ml的比例混匀配制）
4、将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解（溶解后一周内用完）。
5、样本测定（在96孔板中依次加入下列试剂）充分混匀，室温静置30min后，450nm处测定各管吸光值A。

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称	检测方法	产品规格	产品货号
TC总胆固醇测试剂盒可见分光光度法	可见分光光度法	50管/48样	FS-01S63532

注意事项：
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕，其中的WST-8需要在使用时适当分装，以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时，标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释；当样品为血液等无需处理的样品时，宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色，如果设置了使用说明中的空白对照3，就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。
大鼠活化素A受体抗体IgM(ACV-RAb IgM)elisa检测试剂盒