供应AAT酰基转移酶测试剂盒可见分光光度法

产品详情

仪器：
1、分光光度计/酶标仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱（孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器

我司供应的生化检测试剂盒，仅供科研使用。
产品名称：AAT酰基转移酶测试剂盒可见分光光度法
检测方法：可见分光光度法
产品规格：25管/24样
产品分类：脂肪酸代谢系列
产品货号：FS-01S63526
商品介绍：

测定意义
AAT是一个多功能蛋白大家族，主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应，在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。

测定原理：

AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇，释放的CoA还原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，测定412 nm吸光度增加速率可计算AAT活性。

自备仪器和用品：

研钵、冰、台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。

试剂组成和配制:

提取液：液体 100 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体 15 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 3 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂四：液体 3 mL×1 瓶，4℃保存。

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操作步骤：

一、粗酶液提取：
1、细菌、细胞或组织样品的制备
收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1ml提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率200w，超声3秒，间隔10秒。重复30次）；8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。

二、POD测定操作表
测定前将试剂一、二和三 37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）放置10min。在1mL玻璃比色皿中按顺序加入上述试剂，加入样本后立即混匀并计时，记录470nm下30s时的吸光值A1和1min30s后的吸光值A2。计算ΔA=A2-A1
注意：如果ΔA小于0.005，可将反应时间延长到5min。如果ΔA大于0.5，可将样本提取液稀释后测定，计算公式中乘以相应的稀释倍数。

特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速