玉米赤霉烯酮免疫亲和柱，回收率高重复性好

　　【适用范围及性能】

　　玉米赤霉烯酮免疫亲和柱适用于粮食及粮食制品、食品、饲料等样本中的ZEN净化处理，提高了样品的纯度，纯化后的提取液可用不同的分析方法测定。

　　柱容量：≥1500ng

　　【试验原理】

　　玉米赤霉烯酮免疫亲和柱基于抗原抗体特异性反应，将玉米赤霉烯酮抗体偶联与柱内凝胶上，样品提取液通过免疫亲和柱时，提取液内待测毒素(抗原)与抗体特异性结合，形成抗体抗原复合物保留在柱内凝胶上，洗涤出去杂质，用邮寄溶剂解离复合物，洗脱纯净待测毒素用于分析检测。

　　【结果判定】

　　经玉米赤霉烯酮免疫亲和柱净化后，收集到的甲醇洗脱液可直接使用荧光计或者HPLC检测，也可使用薄层色谱或者酶联免疫试剂盒进行检测。收集到的1ml洗脱液中的玉米赤霉烯酮含量相当于1g样品中玉米赤霉烯酮含量。

　　玉米赤霉烯酮亲和柱净化过程

　　----3mL柱管取出上方堵头，减去上堵头螺纹下突出部分，插回柱子上(1mL柱管上方堵头取出后斜 剪断，然后再插回柱子上)，另一端与20mL针筒固定后使用;

　　----准确移取上述混匀滤液，注入针筒中，调节针筒压力使其以2秒/滴的速度缓慢通过免疫亲和柱;

　　----用20mL 水冲洗柱子，流速1秒/滴，弃去流出液，直至2~3mL空气通过柱体，保证柱子内没有残余 液体;

　　----准确加入2mL甲醇(色谱级)洗脱，流速自然重力，直至2~3mL空气通过柱体，保证柱子内没有 残余液体。收集全部洗脱液;

　　----过有机滤膜(孔径0.22μm)后，进行HPLC测定;或用氮气吹干，经流动相复溶，过有机滤膜 (孔径0.22μm)后，参照GB 5009.209-2016或GB/T 28716-2012条件进行HPLC测定。

　　玉米赤霉烯酮亲和柱净化过程注意事项

　　1. 亲和柱使用前，需要提前平衡30min至室温;

　　2. 亲和柱与20mL针筒连接时，一定旋紧20mL针筒与堵头连接处，防止上样过程漏液;

　　3. 采用大量程移液器准确移取混匀滤液进行上样;样液流过柱体的速度不能过快，采用固相萃取架过柱 时可以调节流速为2秒/滴，若无此设备，自然重力流速也可;

　　4. 冲洗柱子时保持自然重力流速即可;对于酱油、醋、油类、玉米加工副产物及饲料等颜色较深的样品， 可以先用10mL 0.1%吐温20-PBS清洗，再用10 mL 10%甲醇-水冲洗，zui后用10mL水冲洗柱子;

　　5. 柱子冲洗过后一定要用洗耳球吹干柱子内残余的液体，但不能让柱子干燥时间过长，要立即加入洗脱 液;

　　6. 采用玻璃移液管准确移取2mL色谱级甲醇进行洗脱，自然重力流速即可(不可施压)，zui后一定要用 洗耳球吹干柱子内残余的甲醇，收集全部洗脱液;

　　7. 洗脱液必需先经过0.22μm滤膜过滤才能进行HPLC测定;

　　8. HPLC测定值接近zui高检出值时，样本实际含量可能大于柱容量而造成流穿，需减少上样体积。